A comprehensive review on the documented characteristics of four Reticulitermes termites (Rhinotermitidae, Blattodea) of China / Uma revisão abrangente sobre as características documentadas de quatro cupins Reticulitermes da China

Termites are known as social insects worldwide. Presently in China 473 species, 44 genera and 4 families of termites have been reported. Of them, 111 Reticulitermes species are widely spread in different zones of China. The dispersion flight season of these Chinese Reticulitermes species are usually started from February to June, but in some regions different species are distributed, sharing their boundaries and having overlapping flight seasons. These reasons become important sources of hybridization between two different heterospecific populations of termites. It was confirmed that the fertilized eggs and unfertilized eggs of some Reticulitermes termites have the capacity of cleavage. While the unfertilized eggs of R. aculabialis, R. chinensis and R. labralis cleaved normally and the only R. aculabialis unfertilized eggs develop in embryos. While, the R. flaviceps and R. chinensis were observed with their abnormal embryonic development, and not hatching of eggs parthenogenetically. They were reported more threatening to Chinese resources as they propagate with parthenogenesis, hybridization and sexual reproduction. Eggshell and macrophiles of eggs play important roles in species identification and control. Although, they are severe pests and cause a wide range of damages to wooden structures and products in homes, buildings, building materials, trees, crops, and forests in China's Mainland.

Os cupins são conhecidos como insetos sociais em todo o mundo. Atualmente na China foram relatadas 473 espécies, 44 gêneros e 4 famílias de cupins. Destas, 111 espécies de Reticulitermes estão amplamente distribuídas em diferentes zonas da China. A temporada de voo de dispersão dessas espécies chinesas de Reticulitermes geralmente começa de fevereiro a junho, mas em algumas regiões diferentes espécies são distribuídas, compartilhando seus limites e tendo temporadas de voo sobrepostas. Essas razões tornam-se importantes fontes de hibridização entre duas populações heteroespecíficas de cupins. Foi confirmado que os ovos fertilizados e não fertilizados de alguns cupins Reticulitermes possuem capacidade de clivagem. Já os ovos não fertilizados de R. aculabialis, R. chinensis e R. labralis clivaram normalmente, e os únicos ovos não fertilizados de R. aculabialis se desenvolvem em embriões. R. flaviceps e R. chinensis foram observados com desenvolvimento embrionário anormal, e não eclosão de ovos por partenogênese. Eles foram relatados como mais ameaçadores para os recursos chineses à medida que se propagam com partenogênese, hibridização e reprodução sexual. Casca de ovo e macrófilos de ovos desempenham papéis importantes na identificação e controle de espécies, embora sejam pragas graves e causem uma ampla gama de danos a estruturas e produtos de madeira em residências, edifícios, materiais de construção, árvores, plantações e florestas na China continental.

Synergistic impact of -linolenic acid and -tocopherol on in vitro maturation and culture of buffalo oocytes

Abstract The objective of the current study was to investigate the synergistic impact of -Tocopherol and -Linolenic acid (100 µM) on IVM and IVC of Nili Ravi buffalo oocytes. Oocytes were obtained from the ovaries of slaughtered buffaloes within two hours after slaughter and brought to laboratory. Buffalo cumulus oocyte complexes were placed randomly in the five experimental groups included; GROUP 1: Maturation media (MM) + 100 µM ALA (control), GROUP 2: MM + 100 µM ALA + 50M -Tocopherol, GROUP 3: MM + 100 µM ALA + 100M -Tocopherol, GROUP 4: MM + 100 µM ALA + 200 M -Tocopherol and GROUP 5: MM + 100 µM ALA + 300 M -Tocopherol under an atmosphere of 5% CO2 in air at 38.5 °C for 22-24 h. Cumulus expansion and nuclear maturation status was determined (Experiment 1). In experiment 2, oocytes were matured as in experiment 1. The matured oocytes were then fertilized in Tyrodes Albumin Lactate Pyruvate (TALP) medium for about 20 h and cultured in synthetic oviductal fluid (SOF) medium to determine effect of -Linolenic acid (100 µM) and -Tocopherol in IVM medium on IVC of presumptive zygotes. To study the effect of -Linolenic acid (100 µM) in IVM media and increasing concentration of -tocopherol in the culture media on early embryo development (Experiment 3), the presumptive zygotes were randomly distributed into the five experimental groups with increasing concentration of -tocopherol in culture media. Higher percentage of MII stage oocytes in experiment 1(65.2±2.0), embryos at morula stage in experiment 2 (30.4±1.5) and experiment 3 (22.2±2.0) were obtained. However, overall results for cumulus cell expansion, maturation of oocyte to MII stage and subsequent embryo development among treatments remain statistically similar (P > 0.05). Supplementation of -tocopherol in maturation media having -Linolenic acid and/or in embryo culture media did not further enhance in vitro maturation of oocyte or embryo production.

Resumo O objetivo do presente estudo foi investigar o impacto sinérgico do -tocoferol e do ácido -linolênico (100 µM) na MIV e CIV de oócitos de búfala Nili Ravi. Os oócitos foram obtidos dos ovários de búfalos abatidos duas horas após o abate e levados ao laboratório. Complexos de oócitos cumulus de búfalo foram colocados aleatoriamente nos cinco grupos experimentais incluídos; GRUPO 1: Meio de maturação (MM) + 100 µM ALA (controle), GRUPO 2: MM + 100 µM ALA + 50 µM -tocoferol, GRUPO 3: MM + 100 µM ALA + 100 µM -tocoferol, GRUPO 4: MM + 100 µM ALA + 200 M -tocoferol e GRUPO 5: MM + 100 µM ALA + 300 M -tocoferol sob uma atmosfera de 5% de CO2 em ar a 38,5 °C por 22-24 h. A expansão cumulus e o estado de maturação nuclear foram determinados (Experimento 1). No experimento 2, os oócitos foram maturados como no experimento 1. Os oócitos maturados foram então fertilizados em meio de Tyrode's Albumina Lactato Piruvato (TALP) por cerca de 20 h e cultivados em meio de fluido oviductal sintético (SOF) para determinar o efeito do ácido -linolênico (100 µM) e -tocoferol em meio IVM em IVC de presumíveis zigotos. Para estudar o efeito do ácido -linolênico (100 µM) em meio IVM e aumentar a concentração de -tocoferol no meio de cultura no desenvolvimento inicial do embrião (Experimento 3), os presumíveis zigotos foram distribuídos aleatoriamente nos cinco grupos experimentais com concentração crescente de -tocoferol em meios de cultura. Maior porcentagem de oócitos em estágio MII no experimento 1 (65,2 ± 2,0), embriões em estágio de mórula no experimento 2 (30,4 ± 1,5) e experimento 3 (22,2 ± 2,0) foram obtidos. No entanto, os resultados gerais para a expansão das células do cumulus, maturação do oócito para o estágio MII e desenvolvimento embrionário subsequente entre os tratamentos permanecem estatisticamente semelhantes (P> 0,05). A suplementação de -tocoferol em meios de maturação com ácido -linolênico e / ou em meios de cultura de embriões não aumentou ainda mais a maturação in vitro de oócitos ou a produção de embriões.

Asynchrony between in vivo and in vitro rabbit embryos

Background: Comparative features of embryos developed under in vitro and in vivo conditions are particularly important in designing embryo transfer procedures that fulfil embryo-recipient synchronization requirements. Objective: To determine the degree of asynchrony in rabbit embryo development between cultured and in vivo embryos. Methods: A total of 55 non- lactating multiparous female rabbits were used. Embryos were classified as 16-cells or early morulae at 48 hours post-coitum (hpc). Embryos were cultured during 30 or 32 h and embryo development was compared with in vivo embryos of 72 hpc. In vitro and in vivo embryos at 72 hpc were classified as early or compacted morulae. Bayesian statistics was used. Difference between in vivo and in vitro embryos and the actual probability of the difference between the in vivo and in vitro embryo higher than zero (P) was estimated. Results: The percentage of compacted morulae was higher in in vivo embryos than in in vitro embryos with +6 h of asynchrony (73.5 and 32.8%, P=1.00). But the percentage of compacted morulae was similar with +8 h asynchrony. Conclusions: In vitro embryos delay their development by + 8 hours compared to in vivo embryos.

Antecedentes: El desarrollo comparativo de embriones producidos in vitro e in vivo es particularmente importante para el diseño de procedimientos de transferencia de embriones cuando se requiere sincronización entre el embrión y la hembra receptora. Objetivo: Determinar el grado de asincronía en el desarrollo embrionario entre embriones in vivo y cultivados. Métodos: Un total de 55 conejas multiparas no lactantes fueron utilizadas. Los embriones se clasificaron en 16 células o mórulas tempranas a las 48 horas después del coito (hpc). Los embriones se cultivaron durante 30 ó 32 horas y el desarrollo embrionario se comparó con embriones de 72 hpc obtenidos in vivo. Los embriones in vitro e in vivo a 72 hpc se clasificaron como mórulas tempranas o compactas. Se utilizó estadística bayesiana. Se estimó la diferencia entre embriones in vivo e in vitro y la probabilidad de que la diferencia sea superior a cero (P). Resultados: El porcentaje de mórulas compactas fue mayor en embriones in vivo que en embriones in vitro con +6 horas de asincronía (73,5 y 32,8%, P=1,00), pero el porcentaje de mórulas compactas fue similar con asincronía de +8 horas. Conclusión: Los embriones cultivados retrasan +8 horas su desarrollo en comparación con los embriones in vivo.

Antecedentes: A aquisição do desenvolvimento de embriões produzidos in vitro e in vivo é particularmente importante na concepção de procedimentos de transferência de embriões em que a sincronização entre o embrião e a fêmea receptora é necessária. Objetivo: Determinar o grau de assincronia no desenvolvimento embrionário entre embriões cultivados e in vivo. Métodos: Um total de 55 coelhos multíparos não lactantes foram usados. Os embriões foram classificados em 16 células ou mórulas iniciais 48 horas de gestação (hpc). Os embriões foram cultivados por 30 ou 32 horas e o desenvolvimento embrionário foi comparado com embriões de 72 hpc obtidos in vivo. Embriões in vitro e in vivo a 72 hpc foram classificados como mórulas precoces ou compactadas. Estatísticas bayesianas foram usadas. A diferença entre embriões in vivo e in vitro e a probabilidade de que a diferença seja maior que zero (P) foi estimada. Resultados: A porcentagem de mórulas compactadas foi maior em embriões in vivo do que em embriões in vitro com +6 horas de assincronia (73,5 e 32,8%, P=1,00). Mas a porcentagem de mórulas compactadas foi semelhante com assincronia de +8 horas. Conclusão: Embriões cultivados atrasam seu desenvolvimento em +8 horas em comparação com embriões in vivo.

Técnicas de substituição de DNA mitocondrial para reduzir a transmissão da Síndrome de Leigh / Mitochondrial DNA replacement techniques to reduce Leigh syndrome transmission

A Síndrome de Leigh (SL) é uma doença neuro-metabólica congênita, que faz parte do grupo das encefalopatias fatais, com progressão e morte dentro de 2 anos, em média. A SL é causada por mutações no DNA que causam alterações na geração de ATP celular pelas mitocôndrias. As mitocôndrias contêm seu próprio DNA (mtDNA) e, ao contrário do DNA nuclear, o mtDNA é herdado somente da mãe. Mulheres portadores de mutações causadoras da SL podem vivenciar experiências muito tristes ao tentarem realizar o sonho da maternidade. As técnicas de substituição de mtDNA mutado com mtDNA saudável de doadora, oferecem a essas mulheres a possibilidade de terem uma criança geneticamente relacionada sem a SL. O desenvolvimento e a aplicação clínica de terapias de substituição de mtDNA já são uma realidade, tendo o primeiro bebê gerado a partir da técnica nascido em 2016. Mas será que essas técnicas são seguras? Neste trabalho, revisamos a SL e algumas técnicas de substituição de mtDNA já aplicadas em humanos, que envolvem a transferência de pronúcleos de zigotos ou de fuso acromático de oócitos. Concluímos que, apesar dos resultados promissores, ainda é cedo para assegurar a aplicabilidade clínica de técnicas de substituição de mtDNA em seres humanos. (AU)

Leigh syndrome (SL) is a congenital neurometabolic disease included in the group of fatal encephalopathies, with progression and death within 2 years on average. SL is caused by mutations in the DNA that cause changes in the generation of cellular ATP by mitochondria. Mitochondria contain their own DNA (mtDNA) and, unlike nuclear DNA, mtDNA is inherited only from the mother. Women with SL mutations may experience mournful situations when attempting to fulfill the dream of motherhood. Techniques for replacing mutant mtDNA with healthy donor mtDNA provide these women with the possibility of having a genetically related child without SL. The development and clinical application of mtDNA replacement therapies is a reality, and the first baby generated using the technique was born in 2016. However, are these techniques safe? In this article, we review SL and some mtDNA replacement techniques that have been used in humans, which involve zygote pronuclear transfer or oocyte spindle transfer. We conclude that, despite the promising results, it is too early to ensure that mtDNA replacement techniques are clinically applicable to humans. (AU)

Desenvolvimento do sistema estomatognático durante a vida intrauterina: revisão de literatura / Development of the stomatognathic system during the intrauterine life: literature review

Através de uma Revisão da Literatura, o trabalho busca consolidar informações sobre o desenvolvimento do sistema estomatognático, durante a vida intrauterina. Foram realizadas pesquisas sobre o tema abordado, nas seguintes bases de dados: Scielo, Medline; Bireme; Google Acadêmico e o PubMed, no intervalo de tempo de agosto de 2006 a junho de 2017. Livros publicados no mesmo período também foram consultados. Foram selecionados os artigos em português ou inglês, que contemplaram assuntos inerentes ao estudo. O desenvolvimento do sistema estomatognático acontece a partir do primeiro mês gestacional. A exposição materna a fatores de risco como infecções, traumatismos, desnutrição e consumo de drogas, pode deixar sequelas no feto, comprometendo estruturas e funções buco-dentais.

Through a Literature Review, this work aims to consolidate information about the development of the stomatognathic system during the intrauterine life. The development of the stomatognathic system happens from the first gestational month. Maternal exposure to risk factors, such as infections, trauma, malnutrition, drug use, may leave sequels in the fetus and may compromise buccal-dental structures and functions.

The influence of light exposure in ambiance during pregnancy in maternal and fetal outcomes: an experimental study / Influência da exposição da luz do ambiente no período gestacional e o resultado fetal: um estudo experimental

Abstract Objective The aim of this study is to evaluate whether exposure to different environmental lighting conditions affects the reproductive parameters of pregnant mice and the development of their offspring. Methods Fifteen pregnant albino mice were divided into three groups: light/dark, light, and dark. The animalswere euthanized on day 18 of pregnancy following the Brazilian Good Practice Guide for Euthanasia of Animals.Maternal and fetal specimens weremeasured and collected for histological evaluation. Analysis of variance (ANOVA) test was used for comparison of the groups considering p ≤ 0.05 to be statistically significant. Results There was no significant difference in the maternal variables between the three groups. Regarding fetal variables, significant differences were observed in the anthropometric measures between the groups exposed to different environmental lighting conditions, with the highest mean values in the light group. The histological evaluation showed the same structural pattern of the placenta in all groups, which was within the normal range. However, evaluation of the uterus revealed a discrete to moderate number of endometrial glands in the light/dark and light groups, which were poorly developed in most animals. In the fetuses, pulmonary analysis revealed morphological features consistent with the transition from the canalicular to the saccular phase in all groups. Conclusion Exposure to different environmental lighting conditions had no influence on the reproductive parameters of female mice, while the offspring of mothers exposed to light for 24 hours exhibited better morphometric features.

Resumo Objetivo Avaliar se a exposição a diferentes luminosidades no ambiente afeta parâmetros reprodutivos de camundongos fêmeas prenhas e o desenvolvimento de sua prole. Métodos Foram selecionados para o estudo 15 camundongos fêmeas albinas prenhas. Os camundongos foram separados em grupos: luz/escuro, luz e escuro. As fêmeas foram eutanasiadas no 18° dia de gestação, seguindo as recomendações do Guia Brasileiro de Boas Práticas para a Eutanásia de animais. Tanto peças maternas como fetais foram mensuradas e coletadas para avaliação histológica. Foi utilizado o teste de Análise de variantes (Anova) para comparação dos grupos, considerando estatisticamente significativo o valor de p ≤ 0,05. Resultados Ao comparar as variáveis maternas entre os três grupos, não foi encontrada diferença estatística significativa. Em relação às variáveis fetais, houve diferenças estatísticas entre as medidas de antropometria dos grupos submetidos a diferentes luminosidades do ambiente, com melhores valores médios no grupo luz. Histologicamente, a avaliação placentária evidenciou em todos os grupos o mesmo padrão estrutural, com todos dentro da normalidade. No entanto, a avaliação de úteros, tanto do grupo luz/escuro quanto do grupo luz,mostrou quantidade discreta amoderada de glândulas endometriais, com pouco desenvolvimento na maioria dos animais. Nos fetos, análise pulmonar evidenciou características morfológicas compatíveis com a transição da fase canalicular para sacular em todos os grupos. Conclusão As exposições a diferentes luminosidades no ambiente não influenciaram nos parâmetros reprodutivos das fêmeas, entretanto, a ninhada das mães que receberam luz em todo período apresentou melhores medidas morfométricas.

Morphogenesis of the rhea (Rhea americana) respiratory system in different embryonic and foetal stages / Morfogênese do sistema respiratório da ema (Rhea americana) em diferentes estágios embrionários e fetais

The rhea (Rhea americana) is an important wild species that has been highlighted in national and international livestock. This research aims to analyse embryo-foetal development in different phases of the respiratory system of rheas. Twenty-three embryos and foetuses were euthanized, fixed and dissected. Fragments of the respiratory system, including the nasal cavity, larynx, trachea, syrinx, bronchi and lungs, were collected and processed for studies using light and scanning electron microscopy. The nasal cavity presented cubic epithelium in the early stages of development. The larynx exhibited typical respiratory epithelium between 27 and 31 days. The trachea showed early formation of hyaline cartilage after 15 days. Syrinx in the mucous membrane of 18-day foetuses consisted of ciliated epithelium in the bronchial region. The main bronchi had ciliated epithelium with goblet cells in the syringeal region. In the lung, the parabronchial stage presented numerous parabronchi between 15 and 21 days. This study allowed the identification of normal events that occur during the development of the rhea respiratory system, an important model that has not previously been described. The information generated here will be useful for the diagnosis of pathologies that affect this organic system, aimed at improving captive production systems.(AU)

A ema (Rhea americana) representa importante espécie silvestre que vem se destacando na pecuaria nacional e internacional. Esta pesquisa objetiva analisar o desenvolvimento embrionário-fetal, em diferentes fases, do sistema respiratório de emas. Vinte e três embriões e fetos foram eutanasiados, fixados e dissecados. Fragmentos do sistema respiratório: cavidade nasal, laringe, traqueia, siringe, brônquios e pulmões, foram coletados e processados para estudos por meio de microscopia de luz e microscopia eletrônica de varredura. A cavidade nasal apresentou, nas primeiras fases de desenvolvimento, epitélio estratificado cúbico. A laringe exibiu epitélio respiratório típico entre 27 e 31 dias. A traqueia aos 15 dias apresentou início de formação da cartilagem hialina. Na siringe a túnica mucosa de fetos de 18 dias e formada por epitélio estratificado ciliado na região bronquial. Os brônquios principais apresentavam epitélio estratificado ciliado com células caliciformes na região siringeal. No pulmão, o estágio parabronquial apresentou numerosos parabrônquios entre 15 a 21 dias. Este estudo permitiu a identificação de eventos normais que ocorrem durante o desenvolvimento do sistema respiratório de emas, importante modelo ainda não descrito. As informações geradas serão úteis para o diagnóstico de patologias que acometem este sistema orgânico, visando a melhoria dos sistemas de produção em cativeiro.(AU)

Description of amino acid and fatty acid content during initial development of Lophiosilurus alexandri (Siluriformes: Pseudopimelodidae), a carnivorous freshwater catfish

Samples of eggs, newly hatched larvae (NHL), and larvae at the end of the lecithotrophic period (eight days after hatching) (LPL) of Lophiosilurus alexandri were collected to determine the amino acid and fatty acid profiles. Crude protein did not change throughout initial development and the concentration of lipids was highest in NHL. The content of the indispensable amino acids (IAA) isoleucine, leucine, and valine decreased in LPL, while in eggs and NHL they remained high and similar in value. The dispensable amino acids (DAA), such as aspartic acid, tyrosine, and glycine, increased in LPL, while alanine decreased. The percentage of neutral lipids increased in LPL. The saturated fatty acid content decreased during ontogeny, while monounsaturated fatty acids decreased only in LPL. The polyunsaturated fatty acid content was highest in LP. Polar fatty acids were found in higher percentages in eggs and NHL, but lower in LPL. Saturated fatty acid content decreased during ontogenetic development, while that of monounsaturated fatty acids decreased only in LPL. Polyunsaturated fatty acid content was highest in LPL. Protein content was maintained during ontogenetic development, while amino acid classes experienced changes. Lophiosilurus alexandri preferentially uses saturated and monosaturated fatty acids as an energy source during its early development.(AU)

Amostras de ovos, larvas recém-eclodidas (NHL) e larvas no final do período lecitotrófico (oito dias após a incubação) (LPL) de Lophiosilurus alexandri foram coletadas para determinar os perfis de aminoácidos e ácidos graxos. A proteína bruta não alterou durante o desenvolvimento inicial e a concentração de lipídios foi maior na NHL. O conteúdo dos aminoácidos indispensáveis (IAA) isoleucina, leucina e valina diminuíram em LPL, enquanto nos ovos e NHL eles permaneceram com valores elevados e semelhantes entre si. Os aminoácidos dispensáveis (DAA), como ácido aspártico, tirosina e glicina, aumentaram em LPL, enquanto a alanina diminuiu. A porcentagem de lipídios neutros aumentou em LPL. O teor de ácidos graxos saturados diminuiu durante a ontogenia, enquanto os ácidos graxos monoinsaturados diminuíram apenas em LPL. O teor de ácidos graxos poliinsaturados foi maior em LPL. Os ácidos graxos polares foram encontrados em porcentagens mais altas em ovos e NHL, e menores em LPL. O teor de ácidos graxos saturados reduziu durante o desenvolvimento ontogenético, enquanto que os ácidos graxos monoinsaturados diminuíram apenas em LPL. O teor de ácidos graxos poliinsaturados foi maior em LPL. O conteúdo de proteínas foi mantido durante o desenvolvimento ontogenético, enquanto as classes de aminoácidos sofreram mudanças. Lophiosilurus alexandri usa preferencialmente ácidos graxos saturados e monossaturados como fonte de energia durante o desenvolvimento inicial.(AU)

Desarrollo embrionario del capitán de la sabana, Eremophilus mutisii (Pisces: Trichomycteridae) / Embryonic development of Eremophilus mutisii, "the captain of the savannah" (Pisces: Trichomycteridae) / Desenvolvimento embrionário do capitán de la sabana, Eremophilus mutisii (Pisces: Trichomycteridae)

Resumen Eremophilus mutisii es una especie nativa, endémica, del altiplano central colombiano, donde tiene un carácter emblemático y con características que permiten inferir algún potencial piscícola. Con el objetivo de avanzar en el conocimiento sobre aspectos relacionados con su reproducción, se adelantó un seguimiento del desarrollo embrionario bajo condiciones controladas de laboratorio. Para ello, ejemplares silvestres y sexualmente maduros fueron inducidos con extracto de hipófisis de carpa, en dosis totales de 5,5 mg kg-1 en hembras y 4,0 mg kg-1 en machos, siguiendo protocolos con respuesta demostrada. La fertilización se realizó en seco y la incubación se adelantó en frascos de vidrio de 3,6 L a 16,15 ± 1,1 °C. Se colectaron muestras cada hora desde ovocélula hasta eclosión, y se establecieron los estadios por medio de observación en estereoscopio y con una descripción también apoyada con material fotográfico. Se trata de huevos esféricos, adherentes, con 1052 ± 60,2 de diámetro, telolecíticos, y con segmentación meroblástica. Para los estadios de cigoto, clivajes, blastomeración, blástula, gástrula, organogénesis y eclosión, la descripción se realiza en 20 momentos clave, referenciados temporalmente en horas posfertilización (HPF), grados hora (grados h-1) y grados día (grados d-1). Comparado con otros bagres nativos, el periodo de desarrollo se considera extenso, con eclosión completa a las 100 HPF (1615 grados h-1; 387,6 grados d-1). Las larvas nacen con una longitud total de 3148 ± 176 m, con un saco vitelino de forma redondeada con un diámetro medio de 0,9 ± 0,08 mm y un volumen de 0,382 mm3.

Abstract Eremophilus mutisii is a native, endemic species of the Colombian central highlands, with an emblematic character and characteristics that allow inferring some fish farming potential. In order to advance our knowledge about aspects related to its reproduction, embryonic development was monitored under controlled laboratory conditions. To this effect, wild and sexually mature specimens were induced with carp pituitary extract, in total doses of 5.5 mg kg-1 in females and 4.0 mg kg-1 in males, following protocols with demonstrated response. Fertilization was performed dry and incubation was carried out in glass vials of 3.6 L at 16.15 ± 1.1 °C. Samples were collected every hour from egg cells to hatching, and stages were established by means of stereoscopic observation and described with supporting photographic material. They are spherical, adherent eggs, with a diameter of 1052 ± 60.2 pn, telolecithal, and with meroblastic segmentation. For the stages of zygote, cleavages, blastocyst formation, blastula, gastrula, organogenesis, and hatching, description was done in 20 key moments, referenced temporarily in post-fertilization hours (PFH), degrees/hour (degrees h-1), and degrees/day (degrees d-1). Compared with other native catfish, the development period is considered extensive, with full hatching at 100 PFH (1615 degrees h-1; 387.6 degrees d-1). The larvae were born with a total length of 3148 ± 176 m, with a rounded yolk sac with a mean diameter of 0.9 ± 0.08 mm and a volume of 0.382 mm3.

Resumo Eremophilus mutisii é uma espécie nativa, endêmica, do altiplano central colombiano, onde têm um caráter emblemático e com características que permitem inferir algum potencial piscícola. Com o objetivo de avançar no conhecimento sobre aspectos relacionados com sua reprodução, fez-se um seguimento do desenvolvimento embrionário sob condições controladas de laboratório. Para isso, exemplares silvestres e sexualmente maduros foram induzidos com extrato de hipófise de carpa, em doses totais de 5,5 mg Kg-1 em Fêmeas e 4,0 mg Kg-1 em machos, seguindo protocolos com resposta demonstrada. A fertilização realizou-se em seco e a incubação foi realizada em frascos de vidro de 3,6 L a 16,15 ± 1,1 °C. coletaram-se amostras cada hora desde ovocélula hasta eclosão, e se estabeleceram os estados por meio de observação em estereoscópio e com uma descrição também apoiada com material fotográfico. Se trata de ovos esféricos, aderentes, com 1052 ± 60,2 de diâmetro, telolécitos, e com segmentação meroblástica. Para os estados de zigoto, clivagens, blastomeração, blástula, gástrula, organogênese e eclosão, a descrição se realiza em 20 momentos chave, referenciados temporariamente em horas pós-fertilização (HPF), graus hora (graus h-1) e graus dia (graus d-1). Comparado com outros bagres nativos, o período de desenvolvimento se considera extenso, com eclosão completa às 100 HPF (1615 graus h-1; 387,6 grados d-1). As larvas nascem com uma longitude total de 3148 ± 176 m, com um saco vitelino de forma arredondada com um diâmetro médio de 0,9 ± 0,08 mm e um volume de 0,382 mm3.

Damage caused by exposure to propofol during gestation of mice / Danos causados pela exposição ao propofol durante a gestação em camundongos

Literature shows that surgical procedure could be necessary at any stage of pregnancy and can cause adverse effects on the mother and fetus. One of the most used anesthetics in surgical centers is propofol however; the safety during pregnancy has not been completely established. The objective of this study was to investigate the possible toxic and teratogenic effects on the intrauterine and post-natal development of mice exposed to the dose of 15 mg kg- 1 propofol on the caudal vein fifth, tenth and fifteenth day of gestation. A significant reduction in weight gain was observed in female mice who received a 15 mg kg-1 dose of propofol on the fifth gestational day. A higher rate of embryonic loss post implantation and resorption was also observed in this group. In regards to physical development, the anesthetic increased significantly the offspring weight gain, the time in which pinna detachment occurred, and the anogenital distance of pups whose females received propofol on the fifteenth day of gestation. Based on these results, we concluded that administration of propofol in the beginning stages of gestation increases the number of abortions and promotes alterations in the physical development of pups whose mothers were anesthetized in the final stages of gestation.

A literatura mostra que o procedimento cirúrgico pode ser necessário em qualquer fase da gravidez podendo causar efeitos adversos sobre a mãe e o feto. Um dos anestésicos mais utilizados nos centros cirúrgicos é o propofol, no entanto, a sua segurança durante a gravidez não foi completamente estabelecida. O objetivo deste estudo foi investigar os possíveis efeitos tóxicos e teratogênicos no desenvolvimento intrauterino e pós-natal de camundongos expostos à dose de 15 mg kg-1 de propofol no quinto, décimo e décimo quinto dia de gestação. Observou-se uma redução significativa no ganho de peso em camundongos fêmeas que receberam uma dose de 15 mg kg-1 de propofol no quinto dia de gestação. Uma taxa maior de perda embrionária pós-implantação e reabsorção também foi observada neste grupo. Em relação ao desenvolvimento físico, o anestésico alterou significativamente o ganho de peso da prole, o tempo em que ocorreu o desprendimento da orelha e a distância anogenital dos filhotes cujas fêmeas receberam propofol no décimo quinto dia de gestação. Com base nesses resultados, concluiu-se que a administração de propofol nos estágios iniciais da gestação aumenta o número de abortos e promove alterações no desenvolvimento físico de filhotes cujas mães foram anestesiadas nos estádios finais da gestação.

Macroscopic and microscopic analysis of 2 embryos and 1 foetus derived from a sheep (Ovis aries) without breed / Análise macroscópica e microscópica de 2 embriões e 1 feto derivados de ovelha (Ovis aries) sem raça

The interest in embryology, the science of the development of a zygote into a completely developed foetus, has increased greatly in recent years due to a number of studies involving embryonic and induced pluripotent stem cells. In addition, the development of techniques such as cloning has aided to understand the critical events that occur during embryonic development. In this study, we describe the morphology of two sheep embryos and one foetus using macroscopic and microscopic techniques. We investigated sheep without defined breed on days 24, 32, and 50 of gestation (estimated by crown-rump length [CR]). Macroscopically, we observed the development of E1 (24 days), with visible optic vesicle, but without retinal pigmentation and the forelimbs bud in development. In the E2 (32 days), we noticed the presence of optic retinal pigmentation and forelimbs more developed in comparison with E1. As expected, F1 revealed an eyeball already covered and the forelimbs developed. Meanwhile, microscopic analysis revealed somite, ventricle, atrium, and oral cavity in development in E1. However, in F1 we were able to identify more complex structures, such as ossification in the spine, ventricle, atrium, intraventricular septum, pericardial sac, and oral cavity with tongue. This work brings more precise and detailed data on the morphological characteristics of the major organ systems (nervous, circulatory, respiratory, digestive, and urinary) at each embryonic and foetal stage analysed.(AU)

O interesse em Embriologia, a ciência do desenvolvimento de um zigoto em um feto completamente desenvolvido, tem aumentado consideravelmente nos últimos anos devido a uma série de estudos envolvendo células-tronco pluripotentes embrionárias e induzidas. Além disso, o desenvolvimento de técnicas como a clonagem tem ajudado a compreender os eventos críticos que ocorrem durante o desenvolvimento embrionário. Neste estudo, descrevemos a morfologia de dois embriões de ovinos e um feto utilizando técnicas macroscópicas e microscópicas. Obtivemos ovelhas sem raça definida com 24, 32 e 50 dias de gestação (estimado pelo método de Crown-Rump, CR). Os conceptos foram mensurados, pesados e caracterizados a olho nu. Macroscopicamente, observamos o desenvolvimento dos embriões E1 (24 dias), apresentando globo ocular sem pigmentação de retina e broto do membro torácico e pélvico. Já o E2 (32 dias), apresentava globo ocular com pigmentação na retina e os membros torácicos e pélvicos mais desenvolvidos. O F1 apresentou olhos cobertos com uma membrana e membros torácicos e pélvicos mais desenvolvidos. Enquanto isso, microscopicamente observamos no E1 somitos, ventrículo, átrio e cavidade oral ainda em desenvolvimento. Porém, no F1 já era possível observar ossificação da coluna espinhal, coração com estruturas mais complexas, como ventrículo, átrio, septo interventricular e saco pericárdio. Além disso, na cavidade oral observamos a formação da língua. Este trabalho fornece informações precisas e detalhadas sobre as características morfológicas dos principais órgãos dos sistemas (nervoso, circulatório, respiratório, digestivo e urinário) em cada fase embrionária e fetal analisadas.(AU)

Heterochronic events in the ontogeny of Columba livia, Coturnix coturnix, and Gallus gallus domesticus / Eventos heterocrónicos en la ontogenia de Columba livia, Coturnix coturnix y Gallus gallus domesticus / Eventos heterocrônicos na ontogenia da Columba livia, Coturnix coturnix e Gallus gallus domesticus

Summary Background: a series of events take place in a precise spatial and temporal context during the development of any organism. Typically, certain ontogenetic processes are consistent with the proper completion of previous events. Objective: to identify possible heterochronic events that may relate to altricial and precocious development patterns. Methods: we analyzed the ontogeny of three species of birds with two different development models: Columba livia (semialtricial 2), Coturnix coturnix, and Gallus gallus domesticus (precocial 2). The starts and endings of thirteen morphological events were compared, from hour 16 of incubation to the time of hatching. Results: while no differences in the sequence of developmental events were found, the events of the maturation stage in the altricial kind started earlier compared to the precocial species. Ontogenetic acceleration events in C. livia and C. coturnix explain how these species reach a level of morphological development similar to that of G. gallus domesticus, but with shorter incubation period. Conclusion: the results provide information not considered in the literature of the specialty about heterochronic events in early developmental stages of poultry.

Resumen Antecedentes: durante el desarrollo de cualquier organismo, tienen lugar una serie de eventos en un contexto espacial y temporal preciso. Comúnmente, ciertos procesos ontogenéticos son congruentes con la adecuada culminación de eventos previos. Objetivo: identificar posibles eventos heterocrónicos que pueden relacionarse con los patrones de desarrollo altriciales y precoces. Métodos: se analizó la ontogenia de tres especies de aves con dos modelos de desarrollo diferentes: Columba livia (semialtricial 2), Coturnix coturnix y Gallus gallus domesticus (precocial 2). Se comparó el inicio y la finalización de trece eventos morfogenéticos, desde las 16 h de incubación hasta el momento de la eclosión. Resultados: si bien no se observaron diferencias en la secuencia de eventos del desarrollo, en la especie altricial los eventos de maduración se iniciaron antes que en las especies precoces. La aceleración de eventos ontogenéticos en C. livia y C. coturnix explicaría cómo estas especies alcanzan un grado de desarrollo morfológico semejante al de G. gallus domesticus pero en un periodo de incubación menor. Conclusión: los resultados de este trabajo aportan información sobre eventos heterocrónicos en las etapas temprana del desarrollo de las aves, no consideradas en la literatura de la especialidad.

Resumo Antecedentes: durante o desenvolvimento de qualquer organismo ocorrem uma série de eventos num contexto espacial e temporal preciso. Comumente, certos processos ontogênicos são consistentes com a conclusão correta de eventos anteriores. Objetivo: identificar possíveis eventos heterocrônicos que podem estar relacionados a padrões de desenvolvimento altriciais e precoces. Métodos: Foi analisada a ontogenia de três espécies de aves com dois modelos diferentes de desenvolvimento: Columba livia (semialtricial 2), Coturnix coturnix e Gallus gallus domesticus (precoce 2). Foram comparados o início e o fim de treze eventos morfogenéticos, a partir das 16 h de incubação até a eclosão. Resultados: embora não foram observadas diferenças na sequência de eventos do desenvolvimento, na espécie altricial os eventos de maturação iniciaram-se mais cedo do que nas espécies precoces. A aceleração de eventos ontogênicos em C. coturnix C. livia pode explicar como essas espécies atingem um grau de desenvolvimento morfológico semelhante ao G. gallus domesticus em um período de incubação mais curto. Conclusão: os resultados deste estudo fornecem informação sobre eventos heterocrônicos nas fases iniciais do desenvolvimento das aves, não são considerados na literatura da especialidade.

Thermal stimulation of Ross®-lineage embryos on a commercial scale / Estimulação térmica dos embriões da linhagem Ross® em escala comercial

ABSTRACT: Artificial incubation is an essential process to obtain healthy birds with good performance; nevertheless, it requires sustained improvement. During this process, incubation temperature is considered a critical factor, which has been studied. The objective of this study was to evaluate the development of Ross(r) embryos after hot and cold thermal stimulation. To this end, temperatures 1.39ºC above the standard temperature and a temperature fixed at 36.00ºC that varied 1.00 to 0.30ºC below the standard temperature were applied during the final embryonic development period (days 14 to 18) for three hours, on a commercial scale. Results revealed that hot and cold thermal stimulations did not cause embryo mortality; the hatching and chick quality index were maintained and even increased. Therefore, we believe that thermal stimulation has the potential to improve hatchery index, and thus grange performance; however, adjustments are needed, varying according to each individual hatchery, before it can used as a protocol.

RESUMO: A incubação artificial é um processo fundamental para obtenção de aves saudáveis e com bom rendimento, contudo, necessita de constantes melhorias. Nesse processo, a temperatura de incubação é considerada um fator crítico e vem sendo estudada. O objetivo deste trabalho foi avaliar o desenvolvimento de embriões da linhagem Ross(r) frente a estimulações térmicas por calor e por frio. Para tanto, temperaturas de 1,39ºC acima da temperatura padrão e de 36,00ºC fixos, abaixo da temperatura padrão (variando de 1,00 a 0,30ºC), foram aplicadas no último período de desenvolvimento embrionário (14º ao 18º dia) por três horas de duração, em escala comercial. Com esse experimento, percebeu-se que as estimulações térmicas por calor e por frio não causaram mortalidade embrionária, mantiveram e até aumentaram os índices de eclosão, bem como a qualidade do pintinho. Dessa forma, acredita-se que as estimulações térmicas têm potencial de melhorar os índices do incubatório, e consequentemente o desempenho na granja, contudo necessita de ajustes, que dependem de cada incubatório para ser utilizada como protocolo.

Anencefalia: conhecimento e opinião dos médicos ginecologistas-obstetras e pediatras de Goiânia / Anencephaly: knowledge and opinion of gynecologists, obstetricians and pediatricians in Goiânia / La anencefalia: conocimiento y opinión de los ginecólogos, obstetras y pediatras en Goiânia

Objetivando analisar o grau de conhecimento e opinião dos médicos sobre anencefalia, foi realizado estudo transversal com 70 ginecologistas-obstetras e pediatras de dois hospitais de Goiânia. Os entrevistados responderam a questionário com 20 perguntas fechadas, com opções "verdadeiro" ou "falso", abrangendo cinco temas distribuídos em 31 afirmações com respostas em escala tipo Likert. A maioria dos entrevistados afirmou ter assistido a aula sobre anencefalia (70%), e a média de acertos foi de 13,17 questões. As afirmações com mais acertos versavam sobre a gestação do anencéfalo (80%) e que anencefalia não significa morte encefálica (72%). As questões com menor número de acertos abordavam doação de órgãos de anencéfalo nascido vivo (35%) e a legislação que permite a interrupção da gestação perante diagnóstico inequívoco de anencefalia (47,1%). Dos profissionais ouvidos, 30,41% concordaram que o anencéfalo tem vida. Conclui-se que a anencefalia ainda é tema polêmico e necessita ser mais conhecida entre médicos.

In order to analyze the knowledge and opinion of physicians about anencephaly, a cross-sectional study was performed, including 70 obstetrician-gynecologists and pediatricians of two hospitals in Goiania, Brazil. The interviewees answered a survey of 20 true or false closed questions. Their opinions were evaluated through a 5-subject questionnaire, with 31 affirmations with a Likert-type response scale. Most of the interviewees (70%) affirmed to have attended classes on anencephaly. The average of correct answers was 13.17. The assertive questions with the highest percentage of correct answers were on anencephalic pregnancy (80%) and the distinction between anencephaly and brain death (72%). The questions with the lowest number of correct answers were about the donation of anencephalic born alive babies' organs (35%) and about the legislation that permits pregnancy termination when anencephaly had been unequivocally diagnosed (47.1%). Among those heard, 30.41% agreed on the fact that anencephalic babies have life. In conclusion, anencephaly is still a controversial topic and physicians need to acquire more knowledge on the subject.

Con el objetivo de analizar el grado de conocimiento y opinión de los médicos sobre la anencefalia, fué hecho estudio transversal con 70 médicos ginecólogos/obstetras y pediatras de los hospitales de Goiânia, Brasil. Los entrevistados respondieron un cuestionario de 20 preguntas de verdadero o falso, y se evaluaron sus opiniones a través de un cuestionario con cinco preguntas que contenían 31 opciones de respuestas en escala tipo Likert. La mayoría (70%) participó en clases sobre anencefalia. El promedio de respuestas correctas fue del 13. 17 preguntas. Las afirmaciones con mayor número de respuestas correctas se registraron en relación a la gestación del anencéfalo (80%) y sobre que no existe en este caso muerte encefálica (72%). Las preguntas con menores números de respuestas correctas se relacionaron a la donación de órganos del anencéfalo nacido vivo (35%) y sobre la legislación que permite la interrupción de la gestación frente al diagnóstico inequívoco de anencefalia (47,1%). El 30,41% estuvo de acuerdo que el anencéfalo tiene vida. A la conclusión se verfiicó que la anencefalia es aún un tema polémico y necesita un mayor conocimiento entre los médicos.

Intrauterine thrombosis of umbilical artery - case report / Trombose intrauterina de artéria umbilical - relato de caso

ABSTRACT: CONTEXT: Umbilical cord thrombosis is related to greater fetal and perinatal morbidity and mortality. It is usually associated with umbilical cord abnormalities that lead to mechanical compression with consequent vascular ectasia. Its correct diagnosis and clinical management remains a challenge that has not yet been resolved. CASE REPORT: This study reports a case of umbilical artery thrombosis that occurred in the second half of a pregnancy. The umbilical cord was long, thin and overly twisted and the fetus presented severe intrauterine growth restriction. The clinical and histopathological findings from this case are described. CONCLUSIONS: This case report emphasizes the difficulty in diagnosing and clinically managing abnormalities of intrauterine life with a high chance of perinatal complications.

RESUMO: CONTEXTO: A trombose do cordão umbilical está relacionada com o aumento da morbimortalidade fetal e perinatal. É geralmente associada a alterações do cordão umbilical que levam à compressão mecânica com consequente ectasia vascular. Seu correto diagnóstico e manejo clínico é um desafio que não está ainda bem esclarecido. RELATO DE CASO: Neste relato se descreve caso de trombose da artéria umbilical de ocorrência na segunda metade da gravidez associada a cordão umbilical longo, fino, excessivamente retorcido, associado a feto com restrição de crescimento intrauterino grave. São descritos seus achados clínicos e histopatológicos correlacionados. CONCLUSÃO: Este relato de caso reforça a dificuldade diagnóstica e de manejo clínico em alteração da vida intrauterina com grande possibilidade de complicações perinatais.

Characterization of HIPSTR highlights the heterogeneous expression pattern of lncRNAs in human embryos and stable cell lines / Caracterização do HIPSTR destaca o padrão de expressão heterogênea de IncRNAs em embriões humanos e linhagens estáveis de células

There is a growing appreciation that eukaryotic genomes are transcribed into numerous, previously undetected - and thus uncharacterized regulatory long non-coding RNAs (lncRNAs). Recent studies are primarily focused on lncRNAs transcribed from intergenic regions and enhancers, leaving antisense lncRNAs the least studied group of lncRNAs. At the same time, antisense transcription occurs in up to 74 % of human gene loci, frequently - from the opposite strand of genes encoding proteins involved in regulation of transcription. Here, we identified HIPSTAR (Heterogeneously expressed from the Intronic Plus Strand of the TFAP2A-locus RNA), a novel conserved lncRNA that is transcribed antisense to the TFAP2A gene. Unlike previously reported antisense lncRNAs, HIPSTR expression does not correlate with the expression of its antisense counterpart. Although HIPSTAR and TFAP2A are co-expressed in in vitro derived neural crest and trophoblast cells, only HIPSTAR and not TFAP2A is specifically expressed in a subset of cells within 8-cell- and morula-stage human embryos. We show that, similar to HIPSTAR, in the individual cells of developing human embryos or of stable cell lines the expression of lncRNAs is more highly heterogeneous than the expression of mRNAs. Finally, we demonstrate that HIPSTAR depletion in HEK293 and H1BP, a human embryonic stem cell line, predominantly affects the expression levels of genes involved in early organismal development and cell differentiation. Together, we show that expression of HIPSTAR and hundreds other lncRNAs is highly heterogeneous in human embryos and cell lines. We use HIPSTAR to exemplify the functional relevance of lncRNAs with heterogeneous and developmental stage-specific expression patterns

Tem sido cada vez mais reconhecido que a transcrição dos genomas eucarióticos produz múltiplos transcritos novos, anteriormente não detectados e ainda não caracterizados, sendo que a maioria é constituida de RNAs não-codificantes longos (lncRNAs) regulatórios. Estudos recentes estão focados principalmente nos lncRNAs transcritos de regiões intergênicas e enhancers; assim, o grupo dos lncRNAs antisenso permanece o menos estudado de todos. Ao mesmo tempo, a transcrição antisenso ocorre em até 74% dos loci de genes humanos, frequentemente - a partir da fita oposta de genes que codificam proteínas envolvidas na regulação da transcrição. No presente trabalho, nós identificamos HIPSTR (Heterogeneously expressed from the Intronic Plus Strand of the TFAP2A-locus RNA), um lncRNA novo conservado que é transcrito a partir da fita antisenso do gene TFAP2A. Ao contrário do anteriormente relatado para os lncRNAs antisenso, a expressão de HIPSTR não está correlacionada com a expressão do gene da fita oposta. HIPSTR e TFAP2A são co-expressos em células da crista neural e em trofoblastos derivadas in vitro, mas somente HIPSTR e não TFAP2A está especificamente expresso num subconjunto de células de embriões humanos nos estágios de 8-células e mórula. Mostramos que, semelhante a HIPSTR, a expressão de lncRNAs é mais altamente heterogênea que a expressão de mRNAs em células individuais de embriões humanos em desenvolvimento ou em linhagens estáveis de células. Finalmente, nós demonstramos que a depleção de HIPSTAR em células HEK293 e H1BP, uma linhagem de células tronco embrionárias humanas, afeta predominantemente os níveis de genes envolvidos no início do desenvolvimento do organismo e na diferenciação de células. No conjunto, nós mostramos que a expressão de HIPSTR e de centenas de outros lncRNAs é altamente heterogênea em embriões humanos e linhagens celulares. Usamos HIPSTR para exemplificar a relevância funcional de lncRNAs com padrões de expressão heterogêneos e estágio-de-desenvolvimento específicos

Limitações e controvérsias na determinação do valor preditivo de critérios de morfologia oocitária e embrionária / Limitations and controversies in determining the predictive value of oocyte and embryo morphology criteria

Com o objetivo de aumentar as taxas de sucesso das pacientes que são submetidas a técnicas de reprodução humana assistida (RHA), numerosos estudos apresentam como foco a identificação do embrião com maior potencial de implantação. Apesar dos avanços tecnológicos significativos da Medicina Reprodutiva baseados no advento da era da genômica, proteômica e metabolômica (OMICS), técnicas rotineiramente aplicáveis ainda não estão disponíveis. Dessa forma, laboratórios de fertilização in vitro(FIV) de todo o mundo selecionam para transferência embriões humanos cultivados in vitrobaseados em parâmetros morfológicos avaliados em microscopia de luz. Diversos parâmetros morfológicos podem ser avaliados desde o estágio pronuclear até o estágio de blastocisto para embriões humanos cultivados in vitro. De modo geral, independentemente do dia da transferência, tais critérios parecem apresentar valor preditivo de viabilidade embrionária quando avaliados individualmente ou coletivamente. No entanto, a subjetividade da avaliação morfológica, bem como a ampla diversidade de sistemas de classificação embrionária aplicados por diferentes clínicas, implica em resultados contraditórios, tornando extremamente difícil a implementação de um consenso do valor preditivo dos diferentes parâmetros morfológicos avaliados. A otimização da seleção embrionária representa um grande potencial de aumento das taxas de sucesso do tratamento, além de possibilitar a realização da transferência de um número reduzido de embriões, minimizando os riscos derivados de estações múltiplas.

In order to increase the success rate of in vitrofertilization cycles, several studies have focused on the identification of the embryo with higher implantation potential. Despite recent advances in the reproductive medicine, based on the OMICs technology, routinely applicable methodologies are still needed. Thus, in most fertilization centers embryo selection for transfer is still based on morphological parameters evaluated under light microscopy. Several morphological parameters may be evaluated, ranging from the pronuclear to blastocyst stage. In general, despite the day of transfer, some criteria are suggested to present a predictive value for embryo viability when analyzed independently or combined. However, the subjectivity of morphological evaluation, as well as the wide diversity of embryo classification systems used by different fertilization centers shows contrasting results, making the implementation of a consensus regarding different morphological criteria and their predictive value a difficult task. The optimization of embryo selection represents a large potential to increase treatment success rates, allowing the transfer of a reduced number of embryos and inimizing the risks of multiple pregnancy.

Challenges and perspectives to enhance cattle production via in vitro techniques: focus on epigenetics and cell-secreted vesicles / Desafios e perspectivas na produção in vitro de embriões bovinos: enfoque epigenético e em vesículas secretadas por células

This review aim to present some clinical problems found in IVP-derived animals focusing on NT procedures and to discuss the possible role of epigenetics in such process. Also, as cell-secreted vesicles have been reported as possible regulators of important physiological reproductive processes such as folliculogenesis and fertilization, it is also presented herein a new perspective of manipulating the pre-implantation period trough effector molecules contained in such vesicles.

Nesta revisão, apresentamos alguns problemas clínicos encontrados nos animais derivados de PIV, principalmente derivados de transferência de núcleo, e discutimos o possível papel da epigenética em tais processos. Além disso, uma vez que vesículas secretadas por células têm sido descritas como possíveis reguladores de processos reprodutivos fisiológicos importantes, tais como a foliculogênese e a fertilização, estas são aqui apresentadas como uma possível nova ferramenta para a manipulação do período embrionário pré-implantacional através de moléculas efetoras, contidas em tais vesículas.

Supplementation of fetal bovine serum alters histone modification H3R26me2 during preimplantation development of in vitro produced bovine embryos / Suplementação com soro fetal bovino altera a modificação de histona H3R26me2 durante o período pré-implantacional em embriões bovinos produzidos in vitro

In vitro production (IVP) of bovine embryos is not only of great economic importance to the cattle industry, but is also an important model for studying embryo development. The aim of this study was to evaluate the histone modification, H3R26me2 during pre-implantation development of IVP bovine embryos cultured with or without serum supplementation and how these in vitro treatments compared to in vivo embryos at the morula stage. After in vitro maturation and fertilization, bovine embryos were cultured with either 0 or 2.5% fetal bovine serum (FBS). Development was evaluated and embryos were collected and fixed at different stages during development (2-, 4-, 8-, 16-cell, morula and blastocyst). Fixed embryos were then used for immunofluorescence utilizing an antibody for H3R26me2. Images of stained embryos were analyzed as a percentage of total DNA. Embryos cultured with 2.5% FBS developed to blastocysts at a greater rate than 0%FBS groups (34.85±5.43% vs. 23.38±2.93%; P<0.05). Levels of H3R26me2 changed for both groups over development. In the 0%FBS group, the greatest amount of H3R26me2 staining was at the 4-cell (P<0.05), 16-cell (P<0.05) and morula (P<0.05) stages. In the 2.5%FBS group, only 4-cell stage embryos were significantly higher than all other stages (P<0.01). Morula stage in vivo embryos had similar levels as the 0%FBS group, and both were significantly higher than the 2.5%FBS group. These results suggest that the histone modification H3R26me2 is regulated during development of pre-implantation bovine embryos, and that culture conditions greatly alter this regulation...

A produção in vitro (PIV) de embriões de bovinos não é apenas de grande importância econômica para a pecuária, mas é também um importante modelo para estudar o desenvolvimento embrionário. O objetivo deste estudo foi avaliar a modificação de histona, H3R26me2 durante o desenvolvimento pré-implantacional em embriões bovinos produzidos in vitro, cultivados com ou sem suplementação de soro fetal bovino (SFB), bem como comparar essa modificação específica entre mórulas produzidas in vitro e in vivo. Após a maturação in vitro e fertilização, embriões foram cultivados com suplementação de 0 ou 2,5% SFB. O desenvolvimento embrionário foi avaliado e embriões foram coletados e fixados em diferentes fases durante o desenvolvimento (2, 4, 8 e 16 células, mórula e blastocisto). Os embriões fixados foram avaliados por imunofluorescência utilizando um anticorpo para H3R26me2. Imagens de embriões corados foram analisadas baseadas na porcentagem do DNA total. Embriões cultivados com 2,5% SFB tiveram uma taxa de desenvolvimento ao estágio de blastocisto maior que o grupo que não recebeu suplementação com SFB (34.85±5,43% vs 23.38±,93%; P<0,05). Níveis de H3R26me2 variaram para ambos os grupos ao longo do desenvolvimento. No grupo 0% SFB, a marcação para H3R26me2 foi mais intensa nos estágios de 4 células (P<0,05), 16 células (P<0,05) e mórula (P<0.05). No grupo 2.5% SFB, apenas os embriões de 4 células tiveram marcação significativamente maior que todas as outras fases (P<0,01). Mórulas produzidas in vivo apresentaram níveis de H3R26me2 semelhantes ao grupo 0% SFB, e ambos foram significativamente maiores que o grupo 2.5% SFB. Estes resultados sugerem que a modificação de histona H3R26me2 é regulada durante o desenvolvimento pré-implantacional de embriões bovinos, e que as condições de cultura alteram de maneira importante esta regulação...